
DNA Gel Extraction Kit
*具体价格咨询当地业务员
产品概述
DNA Gel Extraction Kit采用磁性羧基微球和高效的溶胶体系,适用于从TAE或TBE琼脂糖凝胶中回收长度为100 bp-40 kb的高质量DNA片段。回收过程中不需要用到有毒的酚、氯仿等有机物抽提,也不需要用到耗时的异丙醇或乙醇沉淀。操作简便,溶胶时间短,加入溶胶液体积小,20 min即可完成整个纯化过程。试剂盒内的磁性羧基微球可选择性吸附高达8 μg的DNA片段,不吸附酶、矿物油和其它杂质,得到的DNA纯度高,可直接用于后续酶切、连接、转化、测序和文库构建等实验。
运输和保存方法
常温运输。室温保存,有效期12个月。
TroubleShooting
- 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
- 注意观察各溶液是否有析出或浑浊(尤其冬季等室温为低温环境时),可37℃温浴复溶至溶液澄清,避免影响使用效果。
- 溶胶液MD中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。且应注意避免强光直射。
- PCR扩增产物和酶切产物等反应体系的纯化,建议使用PCR Purification Kit(Cat#L0115)。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
- 本产品仅作科研用途!
Q:需要多长时间的操作时间?
A:操作简便:20 min 即可完成纯化
Q:胶回收试剂盒回收率为多少?
A:回收率>60%,最高可达 90%。
Q:胶回收可以直接回收 PCR 原液吗?
A:可以。溶液还是加溶胶液,只是不用置于 50-60℃温浴了,其他步骤不变。 比例为 PCR 原液 50 uL体系,加 200 uL 溶胶液。片段小的话,也按照说明书的方式加入异丙醇。但更推荐专门的PCR产物纯化试剂盒(货号:L0115)。
Q: 回收效率低怎么办?
A: 回收小片段,可以多加溶胶液,溶胶后可以加入0.3 倍体积的异丙醇,可显著提高回收率;另外使用70℃预热的洗脱液也可以提高回收产量。
Q:加了溶胶液MD后溶液呈紫色什么原因呢?正常吗?
A: 如溶液颜色为橙色或紫色,建议加入10μL 3M醋酸钠(pH值5.2)溶液混合。混合物的颜色变成黄色
后进行后续实验,黄色是DNA结合的最佳pH值。
Q: 回收率低,有什么建议吗?
A: 1)电泳的时候,用新鲜的电泳液,不新鲜的会导致PH值升高,降低DNA和膜的吸附力;
2)切胶的时候在保证目的片段的情况下,尽可能的减少胶体积,并且减少紫外灯下的暴露时间;
3)观察加了溶胶液后混合物的颜色,如果是如溶液颜色为橙色或紫色,需要加入10μL3M醋酸钠(pH值5.2)溶液混合。混合物的颜色变成黄色后进行后续实验;
4)溶胶要完全,可适当延长水浴时间和上下颠倒的次数;
5)加洗脱液前,可适当延长室温晾干时间;
6)70℃预热洗脱液,可提高回收率,加洗脱液时注意加到膜中央,延长室温静置时间。
实验案例
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